С эпидемиологической точки зрения туберкулеза является управляемой инфекцией, так как в случае своевременного выявления и лечения больного человека, возможно прекращение инфекции и оздоровление окружающей среды. Следовательно наиболее важным инструментом в улучшении эпидемиологической ситуации по туберкулезу является качественная бактериологическая диагностика заболевания. Эффективное применение различных бактериологических методов гарантирует:
-во-первых, своевременное выявление и изоляцию бактериовыделителей
-во-вторых, назначение правильного режима химиотерапии больным с лекарственно- устойчивыми формами заболевания
— во – третьих проведение соответствущих – противоэпидемичеких мероприятий в очагах инфекции.
За счет внедрения различных методов исследования лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза проводим как фенотипическую так и генотипические идентификации МТБ.
Фенотипические методы исследования лекарственной чувствительности, проводятся как прямым, так и непрямым способом на жидких и плотных питательных средах, методом пропорций.
Генотипические методы, основанные на выявлении мутаций в генах МБТ, ассоциированных с лекарственной устойчивостью.
Основой постановки диагноза туберкулеза обнаружение в клиническом материале кислотоустойчивых микобактерий туберкулезного комплекса.
Однако чувствительность микроскопического исследования мокроты может составлять всего -40-50%,а наиболее информативным методом обнаружения МБТ являются культуральные исследования.
Левенштейна-Йенсена
До настоящего времени единственной средой для обнаружения микобактерий туберкулеза была плотная яичная среда Л-Йенсена на которой выделение клинических образцов составляло в среднем 2-3 месяца. И хотя посев на эту среду был признан во всем мире « золотым стандартом»,у этого метода довольно много недостатков оказывающих влияние на получение результата.
Методика обработки
К исследуемому материалу в контейнере добавляем 4% щелочь закроем крышку флакона и встряхиваем, оставляем на 15 минут центрифугируем, удаляем надосадочную жидкость производим посев на среду Левенштейна-Йенсена.
Помимо длительности получения результатов и довольно высоких затрат,а в век индустриального птицеводства оказалось невозможным стандартизировать методология приготовления яичных сред.
Самое главное припятствие разница в качестве яиц, полученных от кур с неодинаковым характером питания и содержания, отразившемся на качестве и размере желтка, а следовательно и на ростовых качествах МБТ.
В основе предполагаемых экспресс методов является аппарат Бактек Миджит 960 по сравнению с плотной средой, принцип работы создание специальной жидкой среды на основе питательного бульона Мидлбрук с обогатительной добавкой супплимент для усиленного роста МБТ, раствора антибиотиков для предотвращения контаминации. И сокращение сроков получения роста культура на жидких питательных средах от 5 до 14 дней
Критерии направления больных с использованием прибора Бактек:
-В первые выявленные больные до начала лечения
— больные с распространенным процессом.
— больные с рецидивами до начала лечения
— для контроля химиотерапии (при необходимости)
Метод Хайн тест применяется для быстрого диагностирования туберкулеза и определения устойчивости к препаратам первого и второго рядов,на мультиплексной ПРЦ в комбинации обратной гибридизацией с мембранными полосками, идентификация комплекса М туберкулеза и его резистентность к рифампицину и изониазиду в мокроте с положительным мазком.
Применяетс для быстрого диагностирования туберкулеза в клинических материалах, а также для определения устойчивости к препаратам и первого и второго ряда путем определения мутаций в геноме микобактерий. Включает в себя три стадии:
-Экстракцию ДНК
— амплификацию и
— гибридизацию
И все это проводится в течении –х суток.
Джин эксперт
Автоматизированый молекулярно- генетические метод, позволяет установить туберкулез и МЛУ ТБ, за 2 часа, обладает высокой чувствительностью и существенно снижает сроки получения результатов диагностики ТБ и МЛУ, что обеспечивает своевременность эффективность лечения и инфекционный контроль.
-Автоматизирует обработку образцов, амплификацию ДНК и мультиплексную детекцию на основе ПЦР
— Работать с любыми образцами мокротой, мочой, СМЖ и плевральной жидкостью.
— Одновремнно осуществлять скрининг на М. Туберкулеза и резистентность к рифампицину на95%
-Для работы используются одноразовые картриджи, содержащие все необходимые реагенты для проведения ПРЦ
-Закрытая крышка катриджа исключает контаминацию образцов, поэтому не требуется специальный бокс биологической безопасности
— Результаты теста выдаются через 2 часа и предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах
-Результаты каждого модуля отражаются в реальном времени.
— Информация о времени, оставшимся до получения результата 6 выводится на экран.
Кусемисова М.Ч.,
Заведующий Клинико бактериологической
лабораторией КГКП « Областной
противотуберкулезный диспансер ».