Современные методы ускоренной диагностики туберкулеза

Современные методы ускоренной диагностики туберкулеза

С эпидемиологической точки зрения туберкулеза является управляемой инфекцией, так как в случае своевременного выявления и лечения больного человека, возможно  прекращение инфекции и оздоровление окружающей  среды. Следовательно наиболее важным инструментом  в улучшении эпидемиологической ситуации по туберкулезу  является  качественная  бактериологическая  диагностика заболевания. Эффективное применение различных бактериологических методов гарантирует:

-во-первых, своевременное выявление и изоляцию бактериовыделителей

-во-вторых, назначение правильного режима химиотерапии больным с лекарственно- устойчивыми формами заболевания

— во – третьих проведение соответствущих – противоэпидемичеких мероприятий в очагах инфекции.

За счет внедрения  различных  методов исследования лекарственной чувствительности микобактерий туберкулеза проводим как  фенотипическую так и генотипические идентификации МТБ.

Фенотипические методы  исследования лекарственной чувствительности, проводятся как прямым, так и непрямым способом на жидких  и плотных питательных средах, методом пропорций.

       Генотипические методы, основанные на выявлении  мутаций в генах МБТ, ассоциированных с лекарственной устойчивостью.

     Основой постановки диагноза туберкулеза обнаружение в клиническом материале кислотоустойчивых микобактерий туберкулезного комплекса.

Однако чувствительность микроскопического исследования мокроты может составлять всего -40-50%,а наиболее информативным методом обнаружения МБТ являются культуральные исследования.

Левенштейна-Йенсена

До настоящего времени единственной средой для обнаружения микобактерий туберкулеза была плотная яичная среда Л-Йенсена на которой выделение клинических  образцов составляло в среднем 2-3 месяца. И хотя посев на эту среду был признан во всем мире « золотым стандартом»,у  этого метода довольно много недостатков оказывающих влияние на получение результата.

Методика обработки

                    К исследуемому материалу в контейнере добавляем 4% щелочь закроем крышку                 флакона и встряхиваем, оставляем на 15 минут центрифугируем, удаляем надосадочную жидкость  производим посев на среду Левенштейна-Йенсена.

                 Помимо длительности получения результатов и довольно высоких затрат,а в век индустриального птицеводства оказалось невозможным стандартизировать методология приготовления яичных сред.

Самое главное припятствие разница в качестве яиц, полученных от кур с неодинаковым характером питания и содержания, отразившемся на качестве и размере  желтка, а следовательно и  на ростовых качествах МБТ.

В    основе предполагаемых экспресс методов является аппарат Бактек Миджит 960 по сравнению с плотной средой, принцип работы создание специальной жидкой среды на основе питательного бульона Мидлбрук с обогатительной добавкой супплимент для усиленного роста МБТ, раствора антибиотиков для предотвращения контаминации. И сокращение сроков получения роста культура на жидких питательных средах от 5 до 14 дней

Критерии направления больных с использованием прибора Бактек:

-В первые выявленные больные до начала лечения

— больные с распространенным процессом.

— больные с рецидивами до начала лечения

— для контроля химиотерапии (при необходимости)

Метод Хайн тест   применяется для  быстрого диагностирования туберкулеза и определения устойчивости к  препаратам первого и второго рядов,на мультиплексной ПРЦ в комбинации  обратной гибридизацией с мембранными полосками, идентификация комплекса М туберкулеза и его  резистентность  к рифампицину  и  изониазиду в мокроте с положительным мазком.

Применяетс для быстрого диагностирования туберкулеза в клинических материалах, а также для определения устойчивости к препаратам и первого и второго ряда путем определения мутаций в геноме микобактерий. Включает в себя три стадии:

-Экстракцию ДНК

— амплификацию и

— гибридизацию

И все это проводится в течении –х суток.

Джин эксперт

Автоматизированый  молекулярно- генетические метод, позволяет установить туберкулез и МЛУ ТБ, за 2 часа, обладает высокой чувствительностью и существенно снижает сроки получения результатов диагностики ТБ и МЛУ, что обеспечивает своевременность эффективность лечения и инфекционный контроль.

-Автоматизирует обработку образцов, амплификацию ДНК и мультиплексную детекцию на основе ПЦР

— Работать с любыми образцами мокротой, мочой, СМЖ и плевральной жидкостью.

— Одновремнно осуществлять скрининг на М. Туберкулеза и резистентность к рифампицину на95%

-Для работы используются одноразовые картриджи, содержащие все необходимые реагенты для проведения ПРЦ

-Закрытая крышка катриджа исключает  контаминацию образцов, поэтому не требуется специальный бокс биологической безопасности

— Результаты теста выдаются через 2 часа и предоставляются в графическом, табличном и цифровом форматах

-Результаты каждого модуля отражаются в реальном времени.

— Информация о времени, оставшимся до получения  результата  6 выводится на экран.

 

 Кусемисова М.Ч., 

Заведующий Клинико бактериологической

лабораторией КГКП « Областной

         противотуберкулезный диспансер ».